สืบค้นงานวิจัย
การประยุกต์ใช้เทคโนโลยีการผลิตแอนติบอดีบนผิวเฟจเพื่อการวิจัยและพัฒนาด้านการเกษตร
มณฑารพ ยมาภัย - มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี
ชื่อเรื่อง: การประยุกต์ใช้เทคโนโลยีการผลิตแอนติบอดีบนผิวเฟจเพื่อการวิจัยและพัฒนาด้านการเกษตร
ชื่อเรื่อง (EN): Application of Phage Display Antibody Technology for Agricultural Research and Development
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: มณฑารพ ยมาภัย
บทคัดย่อ: ผลการดำเนินการของชุดโครงการวิจัยนี้ บรรลุตามวัตถุประสงค์ของโครงการเป็นอย่างดีคือสามารถ แสดงให้เห็นถึงศักยภาพของการประยุกตีใช้เทคนโลยีการผสิตแอนติบอดี และการทำวิศวกรรมแอนติบอดี บน ผิวเฟจ ในงานคันคว้า และวิจัย รวมทั้งการประยุกตีใช้ต้านการเกษตร ซึ่งไม่ค่อยเป็นที่แพร่หลาย เพราะส่วน ใหญ่เทคโนโลยีนี้ มักจะถูกไปใช้เฉพาะในการคันคว้าวิจัยทางการแพทย์ ผลงานวิจัยที่เกิดขึ้นนั้น มีในระดับ ต่งๆ กัน ขึ้นกับธรรมชาติของเปีาหมายที่จะใช้ในการตรวจสอบ เทคโนโลยีสำคัญที่เกี่ยวข้องกับชุด โครงการวิจัยนี้ มีตั้งแต่เทคนิคในการเตรียมเป้าหมายให้เหมาะสมในการเอาไปใช้ต่อ การกระตุ้นกระต่ายให้ ผสิตแอนติบอดี และเทคนโลยีแอนติบอดีบนผิวเฟจ ซึ่งมี - ส่วน คือส่วนการคัดหาและผลิตแอนติบอดี และ ส่วนการสร้างคลังแอนติบอดีแบบทุติยภูมิจากสัตว์ที่ถูกกระตุ้นด้วยเป้าหมายที่ต้องการศึกษา โดยในโครงการที่ * นั้น เป็นการพัฒนาวิธีการศัดหาแอนติบอดี จากคลังแอนติบอดีบนผิวเฟจ โดยใช้เป้าหมายซึ่งเป็น ทั้ง แบคทีเรีย ที่เป็นประโยชน์ และก่อโรคในพืช เพื่อแสดงให้เห็นศักยภาพการประยุกตีใช้อย่างกว้างขวาง จากนั้น เป็นการพัฒนาเทคนิคการสร้างคลังแอนติบอดีแบบทุติยภูมิ โดยสร้างจากกระต่ายที่ถูกกระตุ้นด้วยเชื้อ Bradyrhizobium spp. DOA9 ผลการ ทดลองพบว่าสามารถสร้างคลังแอนติบอดีจากเม็ดเสือดขาวชนิด บี จากม้ามกระต่ายเพื่อนำไปแสดงบนผิวเฟจได้สำร็จ และสามารถคัดหาแอนติบอดีที่จับจำเพาะต่อแบคทีเรียได้ ด้วย ส่วนการศึกษา คุณสมบัติของเป้าหมายต่างๆ ที่เป็นผลผลิตทางการเกษตร การผลิตแอนติบอดีตัวยวิธีการ ตั้งเดิม และการตรวจส สอบคุณสมบัติการจับของแอนติบอตี้ที่ได้พัฒนาขึ้น อยู่ในส่วนของโครงการวิจัย ย่อยทั้ง ๓ โครงการ คือโครงการที่ ๒ ซึ่งเป็นเชื้อแบคทีเรียที่มีประโยชน์ต่อพืช ได้แก่แบคทีเรียตรึงไนโตรเจนในกลุ่ม Bradyrhizobium spp. โครงการที่ ๓ เป็นเชื้อ Erwinia carotovora ซึ่งเป็นแบคทีเรียที่ก่อโรคเน่าเละในพืช ตระกูลกะหล่ำ ซึ่งทั้ง ๒ โครงการผู้วิจัยสามารถผลิตเป้าหมายที่มีคุณภาพ เพื่อใช้เป็นแหล่งในการผลิต polyclonal antibody จากกระต่ำย และ monoclonal antibody จากคลังเฟจ ได้สำเร็จเป็นผลดี ส่วนใน โครงการที่ ๔ เป็นนั้น เป้าหมายที่ต้องการศึกษาป็นโปรตีนจำเพาะในเนื้อปลานิลที่ทำให้มีกลิ่นคาว การ คันคว้าวิจัยจึงต้องเริ่มตั้งแต่การโคลนยืน parvalbumin (Pval จากกล้ามเนื้อของปลานิลให้ชื่อว่ OnPval จากนั้นจึงนำฉีดกระตุ้นกระต่าย โปรตีนที่ผลิตไต้นี้สามารถจับกับ monoclonal antibody ที่มีขายใน ท้องตลาดได้ดี และเมื่อนำไปฉีดกระต่าย ก็พบว่กระต่ายสามารถผลิต polyclonal antibody ที่จับกับ OnPval โปรตีนได้ดีเช่นกัน โดยจะข้ามไปจับเฉพาะ OnPva! จากปลาอื่นๆ แต่ไม่จับกับสัตว์อื่น องค์ความรู้ สำคัญจากโครงการวิจัยที่ ๔ จึงอยู่ในส่วนวิธีการผสิต recombinant protein เพื่อใช้เป็นแอนติเจนในการ กระตุ้นการสร้างแอนติบอดี เพราะ polyclona จากกระยสามารถนำไปประยุกตีใช้ต่อได้ดี และในปัจจุบัน มี monoclonal antibody วางขายในท้องตลาดแล้วจึงไม่จำเป็นต้องใช้เทคโนโลยีเฟจในการทำ monoclonal ชื้นมาอีก โดยสรุปจึงเห็นได้ว่าผลงานที่เกิดขึ้น นอกจากจะสามารถนำไปพัฒนาต่อยอด เพื่อ ประยุกต์ใช้ ต่อไปได้ทั้งทางการเกตร ทั้งทางด้านเทคนโลยีการผลิตพืช สัตว์ และ การผลิตปุ๋ยชีวภาพที่แล้ว ยัง สามารถใช้เป็นเครื่องมือในการวิจัยพื้นฐานเพื่อให้เกิดองค์ความรู้ไหมในศาสตร์ต่งๆ ในเชิงการเกษตรอีกด้วย
บทคัดย่อ (EN): The main objective of this research program was successfully accomplished. We were able to demonstrate that phage display and antibody engineering technology could also be apply for agricultural research and development, in addition to biomedical research. The out come of each research projects varied, depending on the nature of the targets that were studied. The key technologies that were related to this research project included the method to prepare targets in the form that will suit subsequent experiments, the protocol for rabbit immunization, and phage display antibody technology, which involved biopanning techniques and the construction of immunized phage display antibody library. In the first project, the method for affinity selection of phage display scFv antibody library against both plant beneficial and pathogenic bacteria were developed to demonstrate their ability to apply to a wide are of research in agriculture. In the next step a method to construct phage display scFv library from B-cell in the spleen of rabbit immunized with Bradyrhizobium spp. DOA9 was and specific rabbit scFv antibody against the bacteria could be selected. The research on the study of various agricultural targets, rasing polyclonal antibody using traditional method, and testing the binding properties of all antibodies produced from this project, are reported in the other three sub-projects of this research program. We wre able to produce high quality targets for the generation of polyclonal antibody from rabbit and monoclonal antibody from phage display library against targets from sub-project number 2 and 3, which are nitrogen fixing bacteria, i.e., Bradyrhizobium spp. and Erwinia carotovora, which caused soft rot disease in crucifers, respectively. As for sub-project 4, the target in this study was specific protein that causes fishy smell, i.e., parvalbumin (Pval) from Nile tilapia named OnPval. The project started with cloning and expression of the gene, then the recombinant protein was injected into the rabbit. Our result indicated this protein can bind to commercial anti-Pval monoclonal antibody and when injected into rabbit, can raised specific polyclonal antibody from the rabbit that bind specifically to fish Pval but did not cross-react with the protein from other animals. Therefore, it is not necessary to produce monoclonal antibody against this protein using phage display technology. Taken together, our results could be further apply to a wide areas of agricul research ranging from plant, animal, and bio-fertilizer research. Morever, it can also be used in basic research for the generation of novel body of knowledge it the field of agriculture as well.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี
คำสำคัญ: ปลานิล
เจ้าของลิขสิทธิ์: ฐานข้อมูล NRMS
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
การประยุกต์ใช้เทคโนโลยีการผลิตแอนติบอดีบนผิวเฟจเพื่อการวิจัยและพัฒนาด้านการเกษตร
มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี
30 กันยายน 2555
การวิจัยและพัฒนาพันธุ์ข้าวโดยใช้เทคโนโลยีชีวภาพภายใต้ความร่วมมือระหว่างกรมการข้าวกับสำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ ระยะที่ 2 แบบหล่อคอนกรีตจากวัสดุเหลือใช้ทางการเกษตร การพัฒนาโครงร่างการวิจัยเพื่อพัฒนาการเรียนการสอน : เอกสารประกอบการประชุมเชิงปฏิบัติการ โครงการวิจัยและพัฒนาเทคโนโลยีการผลิตอ้อย การวิจัยและพัฒนาเทคโนโลยีการผลิตพันธุ์ข้าวสาลีอินทรีย์ การประยุกต์ใช้เทคโนโลยีแอนติบอดีบนผิวเฟจเพื่อการตรวจสอบและการสำรวจโรคเน่าเละจากแบคทีเรียของพืชผักตระกูลกะหล่ำในประเทศไทย การพัฒนาเทคนิคการคัดหาเฟจจากคลังและการพัฒนาคลังชนิดทุติยภูมิ เพี่อการประยุกต์ใช้ทางการเกษตร โครงการวิจัยการประยุกต์ใช้คอนกรีตพรุน (Porous Concrete) สำหรับการพัฒนาแหล่งน้ำ การผลิตรองเท้าบู๊ทสำหรับการเกษตร การบริหารจัดการเทคโนโลยีเพื่อผลิตลำไยนอกฤดูในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย ระยะที่ 1
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก