สืบค้นงานวิจัย
การวิจัยต่อยอดด้านความปลอดภัยของอาหารจากเชื้อแบคทีเรียก่อโรคอาหารเป็นพิษ: จากตลาดสู่โต๊ะอาหาร
ศาสตราจารย์ ดร. (นาง) วันเพ็ญ ชัยคำภา - สำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)
ชื่อเรื่อง: การวิจัยต่อยอดด้านความปลอดภัยของอาหารจากเชื้อแบคทีเรียก่อโรคอาหารเป็นพิษ: จากตลาดสู่โต๊ะอาหาร
ชื่อเรื่อง (EN): Translational Research on Food Safety from Pathogenic Bacteria Causing Food Poisoning: from market to table
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: ศาสตราจารย์ ดร. (นาง) วันเพ็ญ ชัยคำภา
หน่วยงานสังกัดผู้แต่ง:
บทคัดย่อ: โครงการวิจัยนี้มีจุดประสงค์หลักคือเพื่อพัฒนาชุดตรวจส าเร็จรูปแบบอีไลซาและพัฒนาต่อยอด เป็นชุดตรวจแบบอิมมูโนโครมาโตกราฟีส าหรับตรวจหาเชื้อแบคทีเรียก่อโรค คือ Listeria และเชื้อ Vibrio cholerae serogroup O1 ที่ปนเปื้อนในตัวอย่างอาหาร เพื่อให้สามารถตรวจได้สะดวก ประหยัด แม่นย า และทราบผลเร็ว เมื่อเปรียบเทียบกับวิธีเพาะเชื้อที่เป็นวิธีมาตรฐานและวิธีตรวจหาดีเอ็นเอด้วย ปฏิกิริยาลูกโซ่แบบเรียลไทม์รวมทั้งด าเนินการเพื่อขอรับการรับรองมาตรฐาน AOAC ส าหรับชุดตรวจ ส าเร็จรูปแบบอิมมูโนโครมาโตกราฟีเพื่อตรวจหาเชื้อซัลโมเนลลาในอาหารที่พัฒนาไว้แล้วจากผลงานวิจัย ที่ได้รับทุน สวก. ประจ าปี 2559 โครงการวิจัยนี้มีระยะเวลาด าเนินการที่เสนอไว้3 ปี โดยในปีแรกนี้ คณะผู้วิจัยได้ด าเนินกิจกรรมที่เสนอไว้ครบถ้วนทุกกิจกรรมกล่าวคือ ได้เตรียม homogenates ของเชื้อ Listeria spp. และ V. cholerae และแบคทีเรียอื่น ๆ เพื่อใช้เป็น homologous และ heterologous antigens เสร็จเรียบร้อยแล้ว ได้เพาะเลี้ยงเซลล์ hybridoma ที่ผลิตแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนาลที่จับ จ าเพาะกับเชื้อ V. cholerae serogroup O1 แล้ว และท าให้แอนติบอดีบริสุทธิ์ คือมีเฉพาะ IgG จากนั้น ตรวจหา titer ของแอนติบอดีที่เตรียมได้ พบว่ามี 40,000 ELISA units/ml ปริมาตร 1.5 ml (รวมทั้งสิ้น 60,000 units) ซึ่งเพียงพอส าหรับการวิจัยต่อไป นอกจากนี้ยังได้ตรวจยืนยันความเฉพาะของแอนติบอดี ดังกล่าว พบว่าแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนาลที่เตรียมได้จับเฉพาะกับเชื้อ V. cholerae serogroup O1 เท่านั้นและไม่จับกับเชื้อ V. cholerae serogroups อื่น ๆ และแบคทีเรียอื่น ๆ คณะผู้วิจัยได้ออกแบบ และสังเคราะห์เปปไทด์ของ Fructose-1-6-biphosphate aldolase (FBPA) ที่จ าเพาะส าหรับเชื้อ Listeria spp. แล้ว คือ KVYDPRKVIGPGVD ส าหรับใช้เป็นแอนติเจนในการผลิต protein scaffolds ชนิดโมโนโคลนาลที่จับกับ Listeria ได้ทุกสปีซีส์คณะผู้วิจัยได้เตรียม purified recombinant internalin A (InlA) ซึ่งเป็นโปรตีนเฉพาะของเชื้อ Listeria monocytogenes แล้ว และได้ผลิต monoclonal protein scaffolds (affinomes) ที่จับเฉพาะกับ InlA ของ L. monocytogenes ได้ เรียบร้อยแล้ว ซึ่ง protein scaffolds เหล่านี้จะใช้เพื่อตรวจหาแอนติเจนของ L. monocytogenes ต่อไป ซึ่งเป็นกิจกรรมวิจัยของปีที่ 2 คณะผู้วิจัยได้เตรียมแอนติบอดีชนิดโพลีโคลนาล (polyclonal antibodies; PAbs) ต่อเชื้อ Listeria spp. และ V. cholerae ในกระต่าย และสกัดเอาเฉพาะ IgG ออกมาจาก immune sera ของกระต่ายเสร็จเรียบร้อยแล้วเพื่อใช้เป็นส่วนประกอบของชุด immunochromatography ส าหรับตรวจหาแอนติเจนของ Listeria spp., L. monocytogenes, และ V. cholerae O1 ต่อไป คณะผู้วิจัยได้เก็บตัวอย่างอาหารจากตลาดในกรุงเทพและปริมณฑล ทั้งจาก ตลาดสดและซูเปอร์มาร์เก็ต ไปส่วนหนึ่งแล้ว และได้พัฒนาวิธีพีซีอาร์แบบเรียลไทม์เพื่อเพิ่มปริมาณยีน เฉพาะของ Listeria spp., L. monocytogenes และเชื้อ V. cholerae เรียบร้อยแล้ว
บทคัดย่อ (EN): This study aimed to invent ready-to-use ELISA test kit and developed further into immunochromatographic format for detection of pathogenic bacteria namely Listeria spp., L. monocytogenes and Vibrio cholerae serogroup O1 that contaminated in food samples. The test kits should be easy to use, cost-effective (inexpensive), accurate, with rapid turn-around time when compared to the conventional microbiological method and DNA detection by real-time PCR. Also, the previously established Salmonella immunochromatographic test kit (ICT) (from the financial support of ARDA in the fiscal year 2016) will be applied for AOAC certification. The current research project has a 3- year duration. For the first year, we have completed all of the proposed research activities including: preparation of whole cell homogenates of Listeriaspp. and V. cholerae, as well as other bacteria for use as homologous and heterologous antigens. We have cultured a hybridoma secreting mouse monoclonal antibody (Mab) to V. cholerae serogroup O1; then, extracted out the monoclonal IgG from the cell cultured medium and titrated the antibody titer by indirect ELISA. It was found that 60,000 ELISA units of the Mab were recovered from 500 ml of the hybridoma spent medium (1.5 ml of 40,000 ELISA units/ml) which should be adequate for subsequent use. Antigenic specificity of the so-prepared Mab was verified and found to bind only with homogenate of V. cholerae serogroup O1 and did not react to homogenates of V. cholerae of other serogroups and other heterologous bacteria. We have designed and synthesized peptide of fructose-1-6- biphosphate aldolase (FBPA) that is specific to Listeriaspp., i.e., KVYDPRKVIGPGVD, for use as antigen in the production of monoclonal protein scaffolds that bind to all Listeriaspp. We have produced recombinant internalin A (InlA) which is the protein unique to L. monocytogenes and also produced protein scaffolds (arbitrarily called affinomes) that bound to the L. monocytogenes InlA. These protein scaffolds will be used further as the L. monocytogenes detection reagent which is the research activity of the second year. We have also prepared rabbit polyclonal antibodies (Pabs) to Listeriaspp. and V. cholerae and have isolated IgGs from the rabbit immune sera for use in assembling the immunochromatographic test kits for detection of Listeria spp., Listeria monocytogenes and V. cholerae. Finally, we have collected some food samples from fresh markets and supermarkets in Bangkok as well as developed real-time PCR for detection of specific genes of Listeria spp., L. monocytogenes and V. cholerae.Abstract is in the attached file.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: สำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)
คำสำคัญ: ความปลอดภัย
เจ้าของลิขสิทธิ์: ภาควิชาปรสิตวิทยา คณะแพทยศาสตร์ศิริราชพยาบาล มหาวิทยาลัยมหิดล
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
การวิจัยต่อยอดด้านความปลอดภัยของอาหารจากเชื้อแบคทีเรียก่อโรคอาหารเป็นพิษ: จากตลาดสู่โต๊ะอาหาร
สำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)
2560
การวิจัยต่อยอดด้านความปลอดภัยของอาหารจากเชื้อแบคทีเรียก่อโรคอาหารเป็นพิษ: จากตลาดสู่โต๊ะอาหาร (ปีที่ 3) การวิจัยต่อยอดด้านความปลอดภัยของอาหารจากเชื้อแบคทีเรียก่อโรคอาหารเป็นพิษ: จากตลาดสู่โต๊ะอาหาร2 การพัฒนาคุณภาพและความปลอดภัยของปูม้าเพื่อสู่มาตรฐานสินค้าเกษตร โครงการพัฒนาระบบอาหารของประเทศไทย: การวางภาพกรอบระบบอาหารและการวิเคราะห์และพัฒนาระบบอาหารส่วน “การค้า การกระจายและการบริการอาหาร” การพัฒนาระบบอาหาร (Food system) ของประเทศไทย : ระบบการผลิตสินค้าเกษตรและการแปรรูปอาหาร การต่อยอดผลงานวิจัยเรื่องกลไกการก่อโรคของเชื้อ Enterocytozoon hepatopenaei (EHP) เพื่อนำไปใช้ในการควบคุมการระบาดของเชื้อในกุ้ง การใช้เศษเหลือจากการผลิตลำไยเพื่อผลิตเป็นอาหารเสริมทดแทนการขาดแคลนอาหารในธรรมชาติสำหรับเลี้ยงผึ้งพันธุ์ (Apis mellifera L.) การวิจัยและพัฒนาอาหารสำหรับแม่พันธุ์กุ้งขาวแวนนาไม โครงการวิจัยเชิงนโยบายเพื่อการพัฒนาระบบอาหารของประเทศไทย การเสริมอาหารกุ้งด้วยสารสกัด sulfated galactans จากสาหร่ายผมนางเพื่อเพิ่มภูมิคุ้มกันและต้านเชื้อแบคทีเรียตายด่วนในกุ้ง
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก