สืบค้นงานวิจัย
การโคลนและการแสดงออกของยีน Nadph-Cytochrome P450 Reductase ในยุงก้นปล่อง Anopheles Minimus และศึกษาการทำงานของเอนไซม์ CYP6P7 ในหลอด
Dolnapa Kaewpa - มหาวิทยาลัยมหิดล
ชื่อเรื่อง: การโคลนและการแสดงออกของยีน Nadph-Cytochrome P450 Reductase ในยุงก้นปล่อง Anopheles Minimus และศึกษาการทำงานของเอนไซม์ CYP6P7 ในหลอด
ชื่อเรื่อง (EN): Cloning and expression of Anopheles minimus NADPH-Cytochrome P450 reductase gene and in Vitro study of CYP6P7 enzyme system
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Dolnapa Kaewpa
บทคัดย่อ: เอนไซม์ NADPH-ไซโตโครม พี 450 รีดักเตส (CPR) ทำหน้าที่เร่งปฏิกิริยาโยกย้ายอิเล็คตรอนจาก NADPH ไปยังไซโตโครม พี 450 ในเมตาบอลิสมที่เกี่ยวข้องกับไซโตโครม พี 450 การศึกษาครั้งนี้ cDNA ของยีน CPR ได้ถูกแยกออกมาจากยุงก้นปล่อง Anopheles minimus และถูกทำให้แสดงออกในระบบของ Escherichia coli โดย cDNA ของยีนนี้ประกอบด้วยนิวคลีโอไทด์จำนวน 2,040 คู่เบส ซึ่งถอดรหัสได้ โปรตีนที่มีจำนวนกรดอะมิโน 679 ตัวและมีขนาด 77.3 กิโลดาลตัน เมื่อเปรียบเทียบลำดับกรดอะมิโนของ CPR ที่แยกได้จาก An. minimus กับ CPR จาก An. gambiae, Drosophila melanogaster, Musca domestica และ Rattus norvegicus พบว่ามีความเหมือนกัน 96%, 76%, 75% และ 52% ตามลำดับ นอกจากนี้ยังพบส่วนของยีนที่ถูกอนุรักษ์โดยเป็นบริเวณที่จับกับ FAD, FMN และ NADPH ซึ่ง เป็นลักษณะเฉพาะของ CPR ยีน CPR ได้ถูกทำให้แสดงออกในรูปของโปรตีนที่ติดอยู่กับ 6xHis-tagged โดยพบกิจกรรมของเอนไซม์ CPR ทั้งในส่วนของเยื่อหุ้มเซลล์และไซโตซอล โดยส่วนของเอนไซม์ที่จับกับเยื่อ หุ้มเซลล์ได้ถูกทำให้บริสุทธิ์และนำไปหาค่า Km ซึ่งค่า Km ของไซโตโครม ซี และ NADPH คือ 2.4 และ 3.3 ไมโครโมลาร์ตามลำดับ การศึกษาจลนศาสตร์ของเอนไซม์ CPR ในระยะสภาพคงตัวพบว่าน่าจะมีการจับกัน แบบ ternary complex ระหว่างเอนไซม์และสับสเตรททั้งสอง (ไซโตโครม ซี และ NADPH) นอกจากนี้ ยีน CYP6P7 ได้ถูกทำให้แสดงออกในระบบของ Baculovirus โดยจากการทดสอบความเป็นพิษในเซลล์ พบว่าเซลล์แมลงที่มีการแสดงออกของ CYP6P7 สามารถทนต่อสารฆ่าแมลงได้หลายชนิด นอกจากนี้ยังพบว่า เอนไซม์ CPR ที่ถูกทำให้บริสุทธิ์สามารถนำมาใช้ร่วมกับ CYP6P7 ในการหาค่ากิจกรรมของเอนไซม์ CYP6P7 ในเมตาบอลิสมของ 7-อีทอกซีคูมาริน โดยได้ค่า Vmax 46.13 นาโนโมล / นาที / นาโมลของ เอนไซม์ และค่า Km ประมาณ 139 ไมโครโมลาร์ การศึกษาในครั้งนี้ได้ประสบความสำเร็จในการนำยีน CPR จากยุงที่ถูกทำให้แสดงออกในบักเตรีมาใช้ในในการทดสอบค่ากิจกรรมของ CYP6P7 โดยใช้การจำลองระบบ ของ CYP6P7-CPR ในหลอดทดลอง
บทคัดย่อ (EN): M for 7-ethoxycoumarin. This study revealed that CPR heterologously expressed in E. coli could support the activity of CYP6P7 in the CYP6P7-CPR in vitro reconstitution system.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://dcms.thailis.or.th/dcms/dccheck.php?Int_code=126&RecId=4065&obj_id=3493
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยมหิดล
คำสำคัญ (EN): NADPH-Ferrihemoprotein Reductase
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยมหิดล
รายละเอียด: เอนไซม์ NADPH-ไซโตโครม พี 450 รีดักเตส (CPR) ทำหน้าที่เร่งปฏิกิริยาโยกย้ายอิเล็คตรอนจาก NADPH ไปยังไซโตโครม พี 450 ในเมตาบอลิสมที่เกี่ยวข้องกับไซโตโครม พี 450 การศึกษาครั้งนี้ cDNA ของยีน CPR ได้ถูกแยกออกมาจากยุงก้นปล่อง Anopheles minimus และถูกทำให้แสดงออกในระบบของ Escherichia coli โดย cDNA ของยีนนี้ประกอบด้วยนิวคลีโอไทด์จำนวน 2,040 คู่เบส ซึ่งถอดรหัสได้ โปรตีนที่มีจำนวนกรดอะมิโน 679 ตัวและมีขนาด 77.3 กิโลดาลตัน เมื่อเปรียบเทียบลำดับกรดอะมิโนของ CPR ที่แยกได้จาก An. minimus กับ CPR จาก An. gambiae, Drosophila melanogaster, Musca domestica และ Rattus norvegicus พบว่ามีความเหมือนกัน 96%, 76%, 75% และ 52% ตามลำดับ นอกจากนี้ยังพบส่วนของยีนที่ถูกอนุรักษ์โดยเป็นบริเวณที่จับกับ FAD, FMN และ NADPH ซึ่ง เป็นลักษณะเฉพาะของ CPR ยีน CPR ได้ถูกทำให้แสดงออกในรูปของโปรตีนที่ติดอยู่กับ 6xHis-tagged โดยพบกิจกรรมของเอนไซม์ CPR ทั้งในส่วนของเยื่อหุ้มเซลล์และไซโตซอล โดยส่วนของเอนไซม์ที่จับกับเยื่อ หุ้มเซลล์ได้ถูกทำให้บริสุทธิ์และนำไปหาค่า Km ซึ่งค่า Km ของไซโตโครม ซี และ NADPH คือ 2.4 และ 3.3 ไมโครโมลาร์ตามลำดับ การศึกษาจลนศาสตร์ของเอนไซม์ CPR ในระยะสภาพคงตัวพบว่าน่าจะมีการจับกัน แบบ ternary complex ระหว่างเอนไซม์และสับสเตรททั้งสอง (ไซโตโครม ซี และ NADPH) นอกจากนี้ ยีน CYP6P7 ได้ถูกทำให้แสดงออกในระบบของ Baculovirus โดยจากการทดสอบความเป็นพิษในเซลล์ พบว่าเซลล์แมลงที่มีการแสดงออกของ CYP6P7 สามารถทนต่อสารฆ่าแมลงได้หลายชนิด นอกจากนี้ยังพบว่า เอนไซม์ CPR ที่ถูกทำให้บริสุทธิ์สามารถนำมาใช้ร่วมกับ CYP6P7 ในการหาค่ากิจกรรมของเอนไซม์ CYP6P7 ในเมตาบอลิสมของ 7-อีทอกซีคูมาริน โดยได้ค่า Vmax 46.13 นาโนโมล / นาที / นาโมลของ เอนไซม์ และค่า Km ประมาณ 139 ไมโครโมลาร์ การศึกษาในครั้งนี้ได้ประสบความสำเร็จในการนำยีน CPR จากยุงที่ถูกทำให้แสดงออกในบักเตรีมาใช้ในในการทดสอบค่ากิจกรรมของ CYP6P7 โดยใช้การจำลองระบบ ของ CYP6P7-CPR ในหลอดทดลอง
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

Dolnapa Kaewpa. "การโคลนและการแสดงออกของยีน Nadph-Cytochrome P450 Reductase ในยุงก้นปล่อง Anopheles Minimus และศึกษาการทำงานของเอนไซม์ CYP6P7 ในหลอดCloning and expression of Anopheles minimus NADPH-Cytochrome P450 reductase gene and in Vitro study of CYP6P7 enzyme system". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2550

Dolnapa Kaewpa. "การโคลนและการแสดงออกของยีน Nadph-Cytochrome P450 Reductase ในยุงก้นปล่อง Anopheles Minimus และศึกษาการทำงานของเอนไซม์ CYP6P7 ในหลอดCloning and expression of Anopheles minimus NADPH-Cytochrome P450 reductase gene and in Vitro study of CYP6P7 enzyme system". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2550. Print.



TARR Wordcloud:
การโคลนและการแสดงออกของยีน Nadph-Cytochrome P450 Reductase ในยุงก้นปล่อง Anopheles Minimus และศึกษาการทำงานของเอนไซม์ CYP6P7 ในหลอด
Dolnapa Kaewpa
มหาวิทยาลัยมหิดล
2550
การศึกษาในโคลนและการแสดงออกของยีนที่ควบคุมเอนไซ การศึกษาพันธุศาสตร์ของยุงก้นปล่องชนิด Anopheles aconitus การศึกษาพันธุศาสตร์ของยุงก้นปล่องชนิดที่คล้ายกับ anopheles campestris การแยกและการแสดงออกของยีนคล้าย SGI ของยุงก้นปล่องชนิด Anopheles cracens การแยกยีน NADPH cytochrome P450 oxidoreductase [XyCPR] ที่เกี่ยวข้องในวิถีการสังเคราะห์ depudecin จาก Xylaria sp. BCC1067 สายพันธุ์กลายพันธุ์ T170 การศึกษาคุณสมบัติของยีนมะเร็งของไวรัส HPV16 : ความหลากหลายของยีน แหล่งที่อยู่และหน้าที่การกระตุ้นการแสดงออกของยีน ความเข้ากันได้ทางพันธุกรรมของยุงก้นปล่องชนิด Anopheles peditaeniatus ที่มีรูปแบบคาริโอไทป์ต่างกัน การโคลนและการแสดงออกของยีนไคติเนสที่แยกได้จาก Beauveria bassiana ใน Escherichia Coli เอนไซม์เบนโซอิลฟอร์เมต ดีคาร์บอกซิเลส จาก Pseudomonas stutzeri ST-201: การโคลนยีน การศึกษาคุณสมบัติของเอนไซม์แล การผลิตเอนไซม์ cytochrome P450 2C8 โดยใช้แบคทีเรียและการศึกษาบทบาทของกรดอะมิโนบางตำแหน่งในส่วนเร่งป
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair