สืบค้นงานวิจัย
การใช้เทคโนโลยีแอนติบอดีบนผิวเฟจเพื่อการตรวจสอบและติดตามปุ๋ยชีวภาพไรโซเบียม
พรรณลดา ติตตะบุตร - มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี
ชื่อเรื่อง: การใช้เทคโนโลยีแอนติบอดีบนผิวเฟจเพื่อการตรวจสอบและติดตามปุ๋ยชีวภาพไรโซเบียม
ชื่อเรื่อง (EN): Application of Phage Display Technology for detection and monitoring of rhizobial biofertilizer
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: พรรณลดา ติตตะบุตร
บทคัดย่อ: เพื่อให้ได้หัวเชื้อปุยชีวภาพที่มีคุณภาพและปลอดการปนเปื้อน การระบุเชื้อและการติดตามเชื้อจึงมี ความสำคัญและจำเป็นอย่างยิ่งเพื่อให้แน่ใจว่าเกษตรกรจะได้รับประโยชน์จากการใช้ปุยชีวภาพได้เต็ม ประสิทธิภาพ ดังนั้นจึงได้มีการพัฒนาเทคนิคในการระบุเชื้อและการติดตามเชื้อขึ้นมาหลากหลายวิธีโดยเฉพาะ การใช้แอนติบอดี้ แต่อย่างไรก็ตามขั้นตอนในการผลิตยังมีความยุ่งยาก ราคาแพง และให้ประสิทธิภาพต่ำ ดังนั้นในการศึกษานี้จึงได้นำเทคโนโลยีการผลิตโมโนโคนอลแอนติบอดี้บนผิวเฟจ มาใช้ในการระบุเชื้อแบรดดี้ ไรโซเบียม สายพันธุ์ DOA9 โดยผลการทดลองพบว่าโมโนโคนอลแอนติบอดีที่ได้จาก คลังยาโม ๑ ซึ่งเป็นคลัง แอนติบอดีมนุษย์ โคลนที่ RD6/2 มีความจำเพาะเจาะจงกับ DOA9 สูงที่สุด แต่อย่างไรก็ตามยังพบการทำ ปฏิกิริยาจับกับเชื้อแบรดดี้ไรโซเบียม SUT 1-12 ซึ่งเป็นเชื้อที่มีความคล้ายคลึงทางพันธุกรรมกับเชื้อ DOA9 สูง แต่ไม่พบการทำปฏิกิริยาจับกับเชื้อแบรดดี้ไรโซเบียม รวมทั้งเชื้อจุสินทรีย์ดินอื่น ๆ ที่นำมาทดสอบด้วยเทคนิค ELISA ในขณะที่โพลีโคลนอลแอนติบอดี้ที่ผลิตได้จากกระต่ายที่ถูกกระตุ้นโดยการฉีดเชื้อ DOA9 พบว่าทำ ปฏิกิริยาจับกับเชื้อแบรดดี้ไรโซเบียมอื่น ๆ ได้ จากนั้นทำการทดสอบประสิทธิภาพการตรวจสอบและติดตาม เชื้อแบรดดี้ไรโซเบียม สายพันธุ์ DOA9 ในรูปแบบของหัวเชื้อชนิดเหลว และในปมรากถั่วโดยใช้เทคนิค Immunofluorescence พบว่าแอนติบอดีที่ได้จากเฟจโคลน RD6/2 มีความจำเพาะเจาะจงกับ DOA9 สามารถเข้าทำปฏิกิริยาจับกับแอนติเจนได้อย่างมีประสิทธิภาพทั้งในรูปแบบหัวเชื้อชนิดเหลว และในปมรากถั่ว ดังนั้นจึงสามารถนำแอนติบอดีที่ผลิตได้บนผิวเฟจนี้มาประยุกต์ใช้ระบุเชื้อได้อย่างแม่นยำทั้งในระบบการ ผลิตหัวเชื้อปุยชีวภาพ และการติดตามเชื้อในแปลงเกษตรกรต่อไป
บทคัดย่อ (EN): The identification and monitoring of selected organisms in biofertilizers are very important to predict their effectiveness of biofertilizers and ensure the highest usefulness received by the farmers. Techniques based on antibody-antigen reactions have been developed in the analysis of rhizobial inoculants. However, these techniques are complicate, expensive and many times have cross reactivity with other rhizobia or soil bacteria. Thus, the purpose of this study was to develop the monoclonal antibody for Bradyrhizobium sp. DOA9 by using the phage display technology, which allow to isolate antibodies directly from diverse repertoires of antibody genes. The result showed that human monoclonal antibodies against Bradyrhizobium sp. DOA9 were selected from non-immunized human scFv library (YAMO-I library) by using phage display technology. After screening by biopanning method, the phage clone RD6/2 showed high specificity with DOA9 strain by using phage ELISA technique. However, phage clone RD6/2 still have low level of interaction with Bradyrhizobium sp. SUT1- 12, which is similar to DOA9 strain based on phylogenetic tree. On the other hand, polyclonal antibody produce from immunized rabbit with DOA9 strain showed high cross reactivity with other bradyrhizobia. The efficiency of phage clone RD6/2 in identification and monitoring ofDOA9 was confirmed by immunofluorescence technique. The result showed that both types of antigen from pure culture and nodule could be detected by using phage clone RD6/2. Thus, this isolated recombinant antibody could be applied for detection and monitoring bacteria during inoculant production process as well as in the field condition.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี
คำสำคัญ: การติดตาม
คำสำคัญ (EN): monitoring
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
การใช้เทคโนโลยีแอนติบอดีบนผิวเฟจเพื่อการตรวจสอบและติดตามปุ๋ยชีวภาพไรโซเบียม
มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี
30 กันยายน 2555
การพัฒนา เทคโนโลยีชีวภาพบนผิวเฟจ และเทคนิควิศวกรรมแอนติบอดี ในการผลิตโครงสร้างแอนติบอดี ที่มีคุณสมบัติเหมาะสมในการตรวจสอบสารปนเปื้อนทางการเกษตร การพัฒนา เทคโนโลยีชีวภาพบนผิวเฟจ และเทคนิควิศวกรรมแอนติบอดี ในการผลิตโครงสร้างแอนติบอดี ที่มีคุณสมบัติเหมาะสมในการตรวจสอบสารปนเปื้อนทางการเกษตร ชนิด ปริมาณ และชีววิทยาของไรบนฝ้ายในประเทศไทย การประยุกต์ใช้เทคโนโลยีแอนติบอดีบนผิวเฟจเพื่อการตรวจสอบและการสำรวจโรคเน่าเละจากแบคทีเรียของพืชผักตระกูลกะหล่ำในประเทศไทย การประยุกต์ใช้เทคโนโลยีการผลิตแอนติบอดีบนผิวเฟจเพื่อการวิจัยและพัฒนาด้านการเกษตร 2555A17003037 โครงการตรวจสอบองค์ประกอบทางเคมีของของผสม การผลิตแอนติบอดีที่จำเพาะต่อไวรัสในจีนัส Tobamovirus และพัฒนาชุดตรวจสอบไวรัสคุณภาพสูงเพื่อการตรวจรับรองการปลอดโรคไวรัสที่สำคัญใน พริก มะเขือเทศ และแตง การสำรวจระดับแอนติบอดีต่อโรคคลามัยเดียในโคเขต1 การสำรวจระดับแอนติบอดีต่อโรคคลามัยเดียในโคเขต 1 การผลิตแอนติบอดีชนิด IgY ที่จำเพาะต่อฮอร์โมนคอร์ติซอลสำหรับใช้ในชุดตรวจวัดความเครียดในสัตว์
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก