สืบค้นงานวิจัย
การโคลนชิ้น cDNA ของตัวรับ 5-HT จากกุ้งกุลาดำ
Yaowaluck Roshorm - มหาวิทยาลัยมหิดล
ชื่อเรื่อง: การโคลนชิ้น cDNA ของตัวรับ 5-HT จากกุ้งกุลาดำ
ชื่อเรื่อง (EN): (penaeus monodon)‬
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Yaowaluck Roshorm
บทคัดย่อ: ซีโรโทนิน (serotonin, 5-HT) เป็นสารสื่อประสาทที่มีบทบาทสำคัญในการกระตุ้นให้เกิด การเจริญของรังไข่และการวางไข่ของกุ้งในกลุ่ม penaeid ซีโรโทนินสามารถแสดงบทบาทสำคัญ เหล่านี้ได้โดยการจับกับตัวรับของมัน (5-HT receptor) ซึ่งส่วนใหญ่จัดอยู่ในกลุ่ม G-protein coupled receptor การทดลองนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อโคลน cDNA สายสมบูรณ์ ของตัวรับ 5-HT จากกุ้งกุลาดำ (Penaeus monodon) และเพื่อศึกษาการแสดงออกของยีนนี้ในเนื้อเยื่อต่างๆ ของกุ้งแม่พันธุ์และกุ้งตัว เล็ก โดยในขั้นแรกได้ทำการสกัด total RNA จากรังไข่ระยะที่สามของกุ้งแม่พันธุ์และจากสมองและ ปมประสาทส่วนอกของกุ้งตัวเล็ก จากนั้นจึงทำการสร้างสาย cDNA สายแรกด้วยกระบวนการ reverse transcription โดยใช้ oligo(dT) primer แล้วทำการสร้างและเพิ่มจำนวนชิ้น cDNA สายคู่ ด้วยกระบวนการ PCR amplification โดยใช้ degenerate primer ที่ออกแบบมาจากตำแหน่ง อนุรักษ์ของตัวรับ 5-HT กลุ่มที่หนึ่งของสัตว์ไม่มีกระดูกสันหลัง จากนั้นจึงทำการสร้างและเพิ่ม จำนวนชิ้น cDNA ในบริเวณด้านปลาย 3/ และ 5/ ด้วยวิธี Rapid Amplification of cDNA Ends (RACE) ผลการศึกษาพบว่าชิ้น cDNA ของตัวรับ 5-HT มีจำนวนนิวคลีโอไทด์ตั้งแต่ 2282 - 2291 ตัว ซึ่งแปรผันตามจำนวนซ้ำของ GGC ชิ้น cDNA นี้ให้ open reading frame ที่มีความยาว 1764- 1773 นิวคลีโอไทด์ ซึ่งถอดรหัสให้โปรตีนที่ประกอบด้วยกรดอะมิโนจำนวน 588 - 591 ตัว เมื่อนำ ลำดับกรดอะมิโนไปเปรียบเทียบกับฐานข้อมูลใน Genbank พบว่าลำดับกรดอะมิโนนี้มีความเหมือน กับตัวรับ 5-HT มากที่สุดโดยเฉพาะตัวรับ 5-HT ในกลุ่มที่ 1 ของสัตว์ไม่มีกระดูกสันหลัง จากการ วิเคราะห์พบว่าลำดับกรดอะมิโนนี้มีลักษณะต่างๆ ของตัวรับ 5-HT ที่เป็น G-protein coupled receptor การศึกษาการแสดงออกของยีนนี้โดยใช้เทคนิค RT-PCR พบว่ามีการแสดงออกในทุก เนื้อเยื่อที่ศึกษา แต่แสดงออกมากที่สุดที่รังไข่ จึงอาจจะเป็นไปได้ว่าตัวรับ 5-HT นี้มีบทบาทสำคัญ ในกระบวนการสืบพันธุ์ของกุ้ง
บทคัดย่อ (EN): Serotonin (5-HT, 5-hydroxytryptamine) is a neurotransmitter that plays an important role in stimulating ovarian maturation and spawning in penaeid prawns. Serotonin modulates its various physiological functions by interacting with different 5- HT receptors, most of which are G-protein coupled receptors. The objectives of this project are to isolate the full-length cDNA of a putative 5-HT receptor from Penaeus monodon and to determine differential mRNA expression of this 5-HT receptor in various tissues of a female wild broodstock and juvenile prawns. Total RNAs isolated from an ovary (stage III) of the wild broodstock and brain and thoracic ganglia of juvenile black tiger prawns were reverse transcribed by using an oligo(dT) primer. The putative 5-HT receptor cDNA was then amplified by using two degenerate primers corresponding to the conserved amino acid sequences of invertebrate 5-HT1 receptors. Next, sequences in the 3/ and 5/ ends were isolated by Rapid Amplification of cDNA Ends (RACE) strategy. From this study a full-length cDNA of 2282-2291 nucleotides varying to the number of GGC repeat was obtained. It presented one long open reading frame of 1764-1773 nucleotides encoding a protein of 588-591 amino acids. The blast result in Genbank database showed high amino acid sequence identities to 5- HT receptors, especially invertebrate 5-HT1 receptors. Sequence analysis revealed the characteristics of G-protein coupled 5-HT receptors. Tissue distribution study by RTPCR technique revealed that this receptor is expressed in various tissues of P. monodon. However, it is expressed at the highest level in the ovary, suggesting that this 5-HT receptor may be involved in the reproduction process of the black tiger prawn.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เอกสารแนบ: http://dcms.thailis.or.th/dcms/dccheck.php?Int_code=126&RecId=3174&obj_id=2817
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยมหิดล
คำสำคัญ (EN): Serotonin
เจ้าของลิขสิทธิ์: มหาวิทยาลัยมหิดล
รายละเอียด: ซีโรโทนิน (serotonin, 5-HT) เป็นสารสื่อประสาทที่มีบทบาทสำคัญในการกระตุ้นให้เกิด การเจริญของรังไข่และการวางไข่ของกุ้งในกลุ่ม penaeid ซีโรโทนินสามารถแสดงบทบาทสำคัญ เหล่านี้ได้โดยการจับกับตัวรับของมัน (5-HT receptor) ซึ่งส่วนใหญ่จัดอยู่ในกลุ่ม G-protein coupled receptor การทดลองนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อโคลน cDNA สายสมบูรณ์ ของตัวรับ 5-HT จากกุ้งกุลาดำ (Penaeus monodon) และเพื่อศึกษาการแสดงออกของยีนนี้ในเนื้อเยื่อต่างๆ ของกุ้งแม่พันธุ์และกุ้งตัว เล็ก โดยในขั้นแรกได้ทำการสกัด total RNA จากรังไข่ระยะที่สามของกุ้งแม่พันธุ์และจากสมองและ ปมประสาทส่วนอกของกุ้งตัวเล็ก จากนั้นจึงทำการสร้างสาย cDNA สายแรกด้วยกระบวนการ reverse transcription โดยใช้ oligo(dT) primer แล้วทำการสร้างและเพิ่มจำนวนชิ้น cDNA สายคู่ ด้วยกระบวนการ PCR amplification โดยใช้ degenerate primer ที่ออกแบบมาจากตำแหน่ง อนุรักษ์ของตัวรับ 5-HT กลุ่มที่หนึ่งของสัตว์ไม่มีกระดูกสันหลัง จากนั้นจึงทำการสร้างและเพิ่ม จำนวนชิ้น cDNA ในบริเวณด้านปลาย 3/ และ 5/ ด้วยวิธี Rapid Amplification of cDNA Ends (RACE) ผลการศึกษาพบว่าชิ้น cDNA ของตัวรับ 5-HT มีจำนวนนิวคลีโอไทด์ตั้งแต่ 2282 - 2291 ตัว ซึ่งแปรผันตามจำนวนซ้ำของ GGC ชิ้น cDNA นี้ให้ open reading frame ที่มีความยาว 1764- 1773 นิวคลีโอไทด์ ซึ่งถอดรหัสให้โปรตีนที่ประกอบด้วยกรดอะมิโนจำนวน 588 - 591 ตัว เมื่อนำ ลำดับกรดอะมิโนไปเปรียบเทียบกับฐานข้อมูลใน Genbank พบว่าลำดับกรดอะมิโนนี้มีความเหมือน กับตัวรับ 5-HT มากที่สุดโดยเฉพาะตัวรับ 5-HT ในกลุ่มที่ 1 ของสัตว์ไม่มีกระดูกสันหลัง จากการ วิเคราะห์พบว่าลำดับกรดอะมิโนนี้มีลักษณะต่างๆ ของตัวรับ 5-HT ที่เป็น G-protein coupled receptor การศึกษาการแสดงออกของยีนนี้โดยใช้เทคนิค RT-PCR พบว่ามีการแสดงออกในทุก เนื้อเยื่อที่ศึกษา แต่แสดงออกมากที่สุดที่รังไข่ จึงอาจจะเป็นไปได้ว่าตัวรับ 5-HT นี้มีบทบาทสำคัญ ในกระบวนการสืบพันธุ์ของกุ้ง
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

Yaowaluck Roshorm. "การโคลนชิ้น cDNA ของตัวรับ 5-HT จากกุ้งกุลาดำ(penaeus monodon)‬". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2546

Yaowaluck Roshorm. "การโคลนชิ้น cDNA ของตัวรับ 5-HT จากกุ้งกุลาดำ(penaeus monodon)‬". มหาวิทยาลัยมหิดล. 2546. Print.



TARR Wordcloud:
การโคลนชิ้น cDNA ของตัวรับ 5-HT จากกุ้งกุลาดำ
Yaowaluck Roshorm
มหาวิทยาลัยมหิดล
2546
การโคลนและการศึกษาหน้าที่ของ cDNA ที่สร้างโปรตีน Argonaute ในกุ้งกุลาดำ การศึกษาบทบาทหน้าที่ของตัวตอบรับซีโรโตนินในกุ้งกุลาดำ การศึกษาแหลมสิงห์ไวรัสในเนื้อเยื่อประสาทของกุ้งกุลาดำ การสร้างห้องสมุด cDNA จากอวัยวะน้ำเหลืองของกุ้งกุลาดำที่ติดเชื้อไวรัสหัวเหลือง การผลิตและลักษณะสมบัติของโมโนโคลนอลแอนติบอดีจำเพาะต่อเม็ดเลือดกุ้งกุลาดำ Penaeus monodon การแสดงออกและลักษณะสมบัติของตัวยับยั้งเซรีนโปรติเนสจากกุ้งกุลาดำ Penaeus monodon การแสดงออกและการศึกษาคุณลักษณะหน้าที่ทางชีวเคมีของโปรตีน Argonaute ในกุ้งกุลาดำ การศึกษาโปรโมเตอร์ที่สามารถทำงานได้ในเซลล์ปฐมภูมิของกุ้งกุลาดำ การพัฒนาเครื่องหมายพันธุกรรมที่จำเพาะต่อการเจริญเติบโตของกุ้งกุลาดำ การพัฒนาระบบหมุนเวียนน้ำแบบปิดด้วยการใช้สาหร่ายและตัวกรองชีวภาพในการบำบัดในบ่อเลี้ยงกุ้งกุลาดำแบบพัฒนา
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair