สืบค้นงานวิจัย
การศึกษาเพื่อหาแอนติเจนเพื่อการพัฒนาวัคซีนป้องกันการติเชื้อ Campyrobactor jejuni ในไก่โดยการใช้เทคนิค immunoproteomics
พงค์ศักดิ์ ขุนแร่ - มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
ชื่อเรื่อง: การศึกษาเพื่อหาแอนติเจนเพื่อการพัฒนาวัคซีนป้องกันการติเชื้อ Campyrobactor jejuni ในไก่โดยการใช้เทคนิค immunoproteomics
ชื่อเรื่อง (EN): Identifying of antigens for vaccine developmentagainst Campyrobactor jejuni in chicken by usingimmunoproteomic techniques.
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: พงค์ศักดิ์ ขุนแร่
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): PONGSAK KHUNRAE
หน่วยงานสังกัดผู้แต่ง:
  1. มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
บทคัดย่อ: Campylobacter jejuni เป็นเช้ือแบคทีเรียที่มักพบในล าไส้ของไก่ เมื่อผู้บริ โภครับประทาน ผลิตภณั ฑ์จากไก่ที่มีการปนเป้ือนของเช้ือน้ีจะก่อให้เกิดโรคcampylobacteriosis ยงัก่อให้เกิดโรคเกี่ยวกบั ระบบประสาท Guillain-Barre syndrome ที่ท าให้ผู้ป่ วยมีอาการอัมพาตและอาจเสียชีวิตในที่สุด จากการ ตรวจสอบทางดา้นจุลชีววิทยาพบวา่ มีโอกาสพบการปนเป้ือนของเช้ือ C. jejuniจากผลิตภณั ฑ์จากไก่ไดใ้น ทุกข้นั ตอนของกระบวนการผลิต ดังน้ันในงานวิจยัน้ีจึงมีวตัถุประสงค์ที่จะเป็นส่วนหน่ึงในการพฒั นา วคัซีนเพื่อลดการปนเป้ือนของเช้ือ Campylobacter jejuni ในไก่โดยได้ท าการคดัเลือกแอนติเจนของเช้ือเพื่อ น าไ ป พัฒ น าวัค ซี น โ ด ย ใ ช้ เท ค นิ ค SDS-PAGE, Two-dimension Electrophoresis แ ล ะWestern blot เปรียบเทียบท้งัเช้ือ Campylobacter jejuni ชนิดที่ด้ือยาและไม่ด้ือยา ซ่ึงพบวา่ สามารถแยกโปรตีนของเช้ือ C. jejuni NCTC11168 ซ่ึงเป็นสายพนั ธ์ที่ไม่ด้ือยาได้ตามความแตกต่างของค่า pI และขนาดโปรตีน และ หลังจากท า Western blot กบั ซีรัมที่ไดร้ับการติดเช้ือ C. jejuni ท าให้พบโปรตีนขนาดประมาณ 100, 60และ 40 kDa ในขณะที่การวิเคราะห์ Western blot ให้ผลที่ไม่เด่นชดักบั เช้ือที่ด้ือยา เมื่อท าการวิเคราะห์ระบุชนิด โปรตีนท้งั 3 ชนิดด้วยเทคนิค LC-nanoESI-MS/MS สามารถระบุไดว้่าเป็นโปรตีน FlaA, CadF และ OprF ตามล าดับ ซึ่ งมีคุณสมบัติเป็ น immunodominant ที่สามารถทา การกระตุน้ ระบบภูมิคุม้กนั ในไก่ไดแ้ละยงั เป็ นโปรตีนที่ถูกสร้างใน Campylobacter jejuni ทุกๆสายพนัธุ์นอกจากน้ีจากการทดลองยงัสามารถทา การ สังเคราะห์โปรตีน CadF และ FlaA ภายใต้ระบบ E. coli expression system และ ยังสามารถท าการท า บริสุทธ์ิโดยที่โปรตีนยงัอยู่ในรูปละลายน้ าซ่ึงบ่งช้ีว่าโปรตีนมีสภาพใกล้เคียงกับธรรมชาติซ่ึงเป็นการ อนุรักษ์โครงสร้างและ epitopes บนโปรตีนโดยอาจมีผลให้โปรตีนมีประสิทธิภาพสามารถกระตุ้นระบบ ภูมิคุม้กนั ได้อย่างเต็มที่และน าไปสู่การพฒั นาวคั ซีนที่สามารถป้องกนั การติดเช้ือของ C. jejuni ในไก่ได้ อยา่ งมีประสิทธิภาพในอนาคต
บทคัดย่อ (EN): Campylobactor jejuni is a causative agent transmitted enteric disease from animal to human. The effective prevention of C. jejuni infection in chicken is required to control at the farm to minimize the contamination during the steps of chicken meat processing, hence vaccine is highly needed for poultry industry. Here, we screened the antigenic proteins from C. jejuni by using 2-DE and immunoblotting technique in searching for the proteins that might be used as a promising antigen to develop the effective recombinant vaccine. We found 5 protein spots possibly reacted with chicken serum infected with C. jejuni. There were CadF, FlaA and OprF analyzed by LC-nanoESI-MS/MS. Bioinformatics analysis indicated that CadF and FlaA proteins had the B- cell epitopes. We also expressed CadF and FlaA in E. coli by cloning CadF and FlaA gene into pET15bThio vector. The partial CadF encoding some surface exposed parts of ?-helix and loop region of CadF (amino acid residue 35-320) and the partial FlaA encoding some surface exposed parts of ?-sheet and loop region of FlaA (amino acid residue 125-506) were successfully cloned into the vector. The expression of these two recombinant thioredoxin fusion proteins was compared in Escherichia coli BL21 DE3 and BL21 RIL (CodonPlus) and Origami strains. The results revealed that the recombinant thioredoxin fusion CadF was strongly expressed in Escherichia coli BL21 DE3 and Origami strains at 16 h when inducing with 1 mM IPTG with the molecular mass of 43 kDa. ForFlaA, it was found to expressed all type Escherichia coli host cells, including BL21 DE3 and Origami strains at 4 and 16 h with the molecular mass of 49 kDa. However, recombinant thioredoxin fusion CadF was instable due to the self-degradation of the protein. Western-blot analysis with anti-His conjgated HRP antibody also confirmed the successful expression of recombinant thioredoxin fusion FlaA in E. coli. The successful expression of these two recombinants thioredoxin fusion proteins in soluble form provides benefit for sub-unit vaccine development.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
คำสำคัญ: ภูมิคุ้มกัน
คำสำคัญ (EN): immunoproteomics
เจ้าของลิขสิทธิ์: สำนักงานคณะกรรมการวิจัยแห่งชาติ
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

พงค์ศักดิ์ ขุนแร่. "การศึกษาเพื่อหาแอนติเจนเพื่อการพัฒนาวัคซีนป้องกันการติเชื้อ Campyrobactor jejuni ในไก่โดยการใช้เทคนิค immunoproteomicsIdentifying of antigens for vaccine developmentagainst Campyrobactor jejuni in chicken by usingimmunoproteomic techniques.". มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี. 2558

พงค์ศักดิ์ ขุนแร่. "การศึกษาเพื่อหาแอนติเจนเพื่อการพัฒนาวัคซีนป้องกันการติเชื้อ Campyrobactor jejuni ในไก่โดยการใช้เทคนิค immunoproteomicsIdentifying of antigens for vaccine developmentagainst Campyrobactor jejuni in chicken by usingimmunoproteomic techniques.". มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี. 2558. Print.



TARR Wordcloud:
การศึกษาเพื่อหาแอนติเจนเพื่อการพัฒนาวัคซีนป้องกันการติเชื้อ Campyrobactor jejuni ในไก่โดยการใช้เทคนิค immunoproteomics
พงค์ศักดิ์ ขุนแร่
มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
30 กันยายน 2558
ศึกษาสภาวะการติดเชื้อ Brachyspira ในไก่ การใช้แหนใหญ่เลี้ยงไก่พื้นเมือง ผลการใช้มันสำปะหลังแคโรทีนสูง (พันธุ์ระยอง 2) เป็นอาหารไก่กระทง วัคซีน CHULACOV19 การใช้เทคนิค PCR ตรวจสอบลักษณะพันธุกรรม Malignant Hyperthermia ในสุกรพันธุ์เปียแตรง การตรวจหา Suilysin และโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับความรุนแรงของ เชื้อสเตรปโตคอคคัส ซูอิส ที่แยกได้จากสุกรป่วย สุกรปกติที่เป็นพาหะของโรคและคนที่เกี่ยวข้องโดยใช้เทคนิค PCR การพัฒนาการผลิตวัคซีนและสารเสริมอาหารโดยเทคนิคการตรึงเพื่อกระตุ้นภูมิคุ้มกันของปลาทะเลต่อปรสิตสัตว์ น้ำหรือแบคทีเรีย การพัฒนาและประยุกต์ใช้วิธีวินิจฉัยการติดเชื้อกับวัคซีนจากแอนติเจนในกลุ่มเอนไซม์ต่อต้านอนุมูลอิสระสำหรับโรคพยาธิใบไม้ตับสัตว์ การป้องกันและบรรเทาภัยแล้งแบบบูรณาการ การพัฒนาวิธีตรวจหาเชื้อ Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis ในสัตว์เคี้ยวเอื้อง ด้วยเทคนิคอณูชีวโมเลกุล
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair