สืบค้นงานวิจัย
การพัฒนาชุดตรวจดีเอ็นเอเซ็นเซอร์สําหรับตรวจหาเชื้อเอชพีพีอาร์อารเอสในสุกรอย่างง่ายและรวดเร็ว
อาจารย์นายสัตวแพทย์ดร. อรรณพ สุริยสมบูรณ์ - สำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)
ชื่อเรื่อง: การพัฒนาชุดตรวจดีเอ็นเอเซ็นเซอร์สําหรับตรวจหาเชื้อเอชพีพีอาร์อารเอสในสุกรอย่างง่ายและรวดเร็ว
ชื่อเรื่อง (EN): Simple and rapid detection of highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus (HP-PRRS) by DNA sensor
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: อาจารย์นายสัตวแพทย์ดร. อรรณพ สุริยสมบูรณ์
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Dr.Annop Suriyasomboon
หน่วยงานสังกัดผู้แต่ง:
บทคัดย่อ: โรคพีอาร์อาร์เอส (Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS) เป็นโรคที่เกิดจากการติดเชื้อ ไวรัสทางระบบสืบพันธุ์และระบบทางเดินหายใจในสุกร ก่อให้เกิดความเสียหายทางเศรษฐกิจต่อการเลี้ยงสุกรเป็น อย่างมากทั่วโลก ในการเลี้ยงสุกรจึงจำเป็นต้องมีเครื่องมือที่ใช้ในการตรวจวินิจฉัยโรคที่แม่นยำ งานวิจัยนี้ได้ ประยุกต์เทคนิดการเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรมเป้าหมายที่อุณหภูมิเดี๋ยว มาใช้ในการเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรมอาร์ เอ็นเอ (RNA) ให้ง่ายและรวดเร็ว เพื่อลดข้อจำกัดในการพึ่งพาห้องปฏิบัติการ โดยทำการออกแบบไพรเมอร์ให้ จำเพาะกับขืน NSP2, ORF7 และ ORF67 ของไวรัสพีอาร์อาร์เอสเพื่อการเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรมของไวรัส PRRS สายพันธุ์รุนแรง (Highly pathogenic strain, HP-PRRS) สายพันธุ์อุโรป และสายพันธุ์อเมริกาเหนือ ตามลำดับ พร้อมกับการพัฒนาระบบการตรวจวิเคราะห์ผลด้วยการตรวจสอบสัญญาณของสารพันธุกรรม โดยใช้สาร พันธุกรรมของไวรัสสายพันธุ์รุนแรง (HP-PRRS) เป็นไมเดล และใช้การเรืองแสงของหมู่เรืองแสงในรูปอนาล็อกดี เอ็นเอโพรม (Amalog DNA probe) ที่ติดหมู่เรืองแสงที่เป็นคู่สม การเรืองแสงของสัญญาณดีเอ็นเอจะเกิดขึ้นเมื่อโพ รบจับกับดีเอ็มเอเป้าหมาขบนพื้นฐานหลักการนิวคลิอิคไสบริใดเซซ้น (Nucleic hybrididization) ท้าให้เกิดการเรือง แสง ผลการศึกษาพบว่าสามารถเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรมของไวรัสในระดับจำกัด (Limit of of detection) ได้ที่ 100 กี อปปี้ (copies) โดยมีความจำเพาะต่อไวรัสเป้าหมายทั้งสามสายพันธุ์ และสามารถแยกความแตกต่างของการทดสอบ จากไวรัสชนิดอื่น เช่น PRRSV ต่างสายพันธุ์ Porcine circovinus, , Porcine parvovins, Classical Swine Fever vinas Influenza A vinus, H5NI, H3NI และ HINI ในการวิเคราะห์ผลด้วยการตรวจสอบสัญญาณ ผลการศึกษาพบว่า สามารถมองเห็นการเรืองแสงของหมู่เรืองแสงเกิดขึ้นด้วยตาเปล่าอย่างชัดเจน เมื่อโพรบทำการจับกับดีเอ็นเอ เป็าหมาย ทั้งนี้ระยะเวลาที่ใช้ในการตรวจทั้งหมดประมาณ 1 ชั่วโมง แบ่งเป็นขั้นตอบในการสกัดสารพันธุกรรม 20 นาที การเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรม 30-40 นาที และการตรวจสอบสัญญาณการเปลี่ยนแปลงสี 3 นาที วิธีการ ทดสอบที่ได้มีประสิทธิภาพ ไม่ต้องพึ่งพาเครื่องมือที่ชับซ้อน และสามารถตอบสนองหลักการ point of care
บทคัดย่อ (EN): Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV, is one of the important diseases in swine product. PRRS is caused econimc losses all over the world. The PRRS virus is a virus in family Arteriviridae, with a small enveloped, single positive-stranded RNA genome. The early detection of pathogens at field sites is a requirement for the effective control and management of the potentially serious economic losses that can result from disease out breaks. The aim of this study was to develop a DNA sensor for detection a highly pathogenic PRRS virus, HP-PRRS, which allow a rapid analysis and enabling the assay to be performed on site. The DNA sensor was developed by using the loop-mediated isothermal amplification technique. The DNA synthesis reaction was studied by using the specific primers. The primers were designed with focusing on the NSP2, ORF7 and ORF6/7 genes of the HP-PRRS, European stain (PRRS-EU), and North America strain (PRRS-US), respectively. The detection system was performed base on the HP-PRRS virus, by using the fluorescence technique. Fluorescence signals were detect the binding of analog DNA probe and specific binder, after the nucleic hybridization. The DNA binder and analog DNA probe showed the strong light intensity that can see by naked eyes. The sensitivity detection of the reaction by using a piece of the NSP2 gene of known copy number was performed. The sensitivity of primers can detect at 100 copies of DNA. The specificity of the DNA sensor was specific to the three strain of PRRSV, and was distinguished to the other viruses such as Porcine circovirus, porcine parvovirus, classical swine fever virus, and other viruses spicies i.e. Influenza A virus, H5N1, H3N1 and H1N1. The total time spending of the DNA sensor testing was approximately one hour. The testing methods were the extraction method, 20 minutes, the loop-mediated amplification method, 30-40 minutes, and the detection step, 3 minutes.
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
เผยแพร่โดย: สำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)
คำสำคัญ: สุกร
คำสำคัญ (EN): Swine
เจ้าของลิขสิทธิ์: ภาควิชาสัตวบาลคณะสัตวแพทยศาสตร์ จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง


TARR Wordcloud:
การพัฒนาชุดตรวจดีเอ็นเอเซ็นเซอร์สําหรับตรวจหาเชื้อเอชพีพีอาร์อารเอสในสุกรอย่างง่ายและรวดเร็ว
สำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)
2556
การพัฒนาชุดตรวจภูมิคุ้มกันของโรคอหิวาต์แอฟริกาในสุกร การพัฒนาดีเอ็นเอไบโอเซนเซอร์เพื่อการตรวจหาเชื้อลิสทีเรียในผลิตภัณฑ์อาหาร การพัฒนาดีเอ็นเอไบโอเซนเซอร์เพื่อการตรวจหาเชื้อแคมไพโลแบคเตอร์ในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์ การพัฒนาแบคทีเรีย Lactobacillus plantarum ที่แยกได้จากมูลสุกรพันธุ์พื้นเมืองเพื่อใช้เป็นโพรไบโอติกแบคทีเรียที่มีคุณสมบัติในการป้องกันโรคพีอีดีในสุกร การพัฒนาวิธีตรวจหาซีรัมนิวทรัลไลซิงแอนติบอดีต่อไวรัสพีพีอาร์ด้วยเทคนิคซูโดไทป์ การพัฒนาดีเอ็นเอไบโอเซนเซอร์เพื่อการตรวจหาเชื้อซัลโมเนลลาในผลิตภัณฑ์อาหาร 2 การพัฒนาดีเอ็นเอไบโอเซนเซอร์เพื่อการตรวจหาเชื้อซัลโมเนลลาในผลิตภัณฑ์อาหาร “การตรวจสอบความถูกต้องของชุดทดสอบทางจุลชีววิทยาเชิงคุณภาพของชุดตรวจดีเอ็น เอแบบแถบชนิด 3 in 1 สําหรับเชื้อซัลโมเนลลา ลิสทีเรีย และ แคมไพโลแบคเตอร์ในผลิตภัณฑ์อาหาร” 3 in 1 ดีเอ็นเอเซนเซอร์เพื่อการตรวจหาเชื้อซัลโมเนลลา ลิสทีเรีย และ แคมไพโลแบคเตอร์ในผลิตภัณฑ์อาหาร การพัฒนาชุดเครื่องหมายดีเอ็นเอสำหรับคัดเลือกลักษณะการให้ปริมาณน้ำนมและความต้านทานโรคเต้านมอักเสบในโคนมทรอปิคอลโฮลสไตน์
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก