สืบค้นงานวิจัย
การตรวจสอบสารพิษแอฟลาทอกซิน โดยวิธี ELISA (Enzyme - Linked Immunosorbent Assay)
ประวัติ ตันบุญเอก - กรมวิชาการเกษตร
ชื่อเรื่อง: การตรวจสอบสารพิษแอฟลาทอกซิน โดยวิธี ELISA (Enzyme - Linked Immunosorbent Assay)
ชื่อเรื่อง (EN): Detection of Aflatoxin B1 by Enyzme - Linked Immunosorbent Assay (ELISA)
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ: ประวัติ ตันบุญเอก
ผู้แต่ง / หัวหน้าโครงการ (EN): Prawat Tanboon - Ek
ผู้ร่วมงาน / ผู้ร่วมวิจัย:
  1. อมรา สนิมทอง
  2. กลอยใจ สำเร็จวาณิชย์
ผู้ร่วมงาน / ผู้ร่วมวิจัย (EN): Amara Sanimtong and Kloyjai Samretwanich
คำสำคัญ:
  1. สารพิษแอฟลาทอกซิน
  2. ELISA
คำสำคัญ (EN):
  1. aflatoxin
  2. ELISA
บทคัดย่อ: นำเทคนิค ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) มาปรับปรุงใช้ในการตรวจสอบสารพิษแอฟลาทอกซิน ปัจจัยสำคัญในการตรวจสอบคือ แอนติซีมรัมที่เฉพาะเจาะจงกับแอฟลาทอกซินชนิดนั้น ๆ จึงทำการผลิตแอนติซีมรัมของสารพิษแอฟลาทอกซิน B1 โดยฉีดสารพิษแอฟลาทอกซิน B1 ที่ผูกเชื่อมกับโปรตีน brovine serum albumin โดยพันธะทางเคมีเข้าไปทางด้านหลังของกระต่าย (intradermal multiple site injection) แอนติซีรัมที่ผลิตได้ครั้งนี้มีความเข้มข้นสูงถึง 1:15,000 เมื่อวัดความเข้มข้นโดยวิธี ELISA นับว่าเป็นความสำเร็จครั้งแรกของประเทศไทย ในการผลิตแอนติซีรัมต่อต้านสารพิษแอฟลาทอกซินซึ่งสามารถนำไปใช้ประโยชน์ในการวิเคราะห์และตรวจสอบสารพิษโดยวิธีทาง Immunological Assay เช่น วิธี ELISA สารพิษแอฟลาทอกซินเป็นสารโมเลกุลเล็ก วิธีการที่ใช้ในการตรวจสอบเป็นวิธีการแบบแข่งขัน (competitive ELISA) โดยภาชนะรองรับปฏิกริยา (polystyrene plate) จะถูกเคลือบด้วยแอนติซีรัมของสารพิษแอฟลาทอกซิน B1 ก่อน หลังจากล้างด้วยบัฟเฟอร์ PBS- Tween แล้วจึงหยดน้ำคั้นของข้าวโพดหรืออาหารสัตว์ที่สกัดใน methanol หรือสารพิษแอฟลาทอกซินมาตรฐานลงไปและใส่สารพิษแอฟลาทอกซินที่ผูกเชื่อมกับเอนไซม์ชี้บอก (Aflatoxin B1 - enzyme peroxidase conjugate ตามลงไปในปริมาณที่เท่า ๆ กัน ปฏิกริยาการเกาะจับระหว่างแอนติบอดี้และสารพิษแอฟลาทอกซินเอนไซม์ชี้บอก อ่านได้หลังจากเดิม substrate ที่ทำปฏิกริยาเฉพาะเจาะจงกับเอนไซม์ชี้บอกลงไปจะเกิดการเปลี่ยนสีเป็นสีน้ำตาลส้ม หลังจากหยุดปฏิกริยาด้วย H2SPO4 แล้วจึงอ่านค่าความเข้มข้นของสีที่ช่วงคลื่น 490 นาโนมิเตอร์ ตัวอย่างใดที่มีคค่าความเข้มข้นของสีต่ำแสดงว่ามีสารพิษแอฟลาทอกซิน วิธี ELISA นี้ สามารถตรวจสอบสารพิษแอฟลาทอกซินได้ในปริมาณที่ต่ำถึง 0.1 ug/มล. เป็นวิะที่สะดวก รวดเร็ว และปลอดภัยต่อผู้ปฏิบัติงาน นอกจากนี้ ต้นทุนต่อตัวอย่างในการตรวจสอบต่ำมาก
บทคัดย่อ (EN): A specific microtest plate enzyme - linked inmunosorbent sassay has been developed for the rapid quantiation of Aflatoxin B1 as low as 0.1 ug per assay, Multiple site injection of rabbit with the commercially available haptens, Aflatoxin B1 - oxime - brovine serum albumin conjugate, was used for the production of antiserum. ELISA titration of Aflatoxin B1 antibody was obtained from four rabbits as high as 1: 15,000. It was the first production of antiserum against Aflatoxin B1 in Thailand which will further be used for the Aflatoxin detection by ELISA in agricultural commodities. Direct competitive ELISA was used for detection of Aflatoxin B1. Aflatoxin B1 was extracted in methanol from naturally contaminated corn and feeds. Wells of a polystrene microplate were coated with diluted antibody. The plates were washed in PBS - Tween. Thereafter aflatoxin B1 standards or sample extracts were added to each well, followed by equal amount of Aflatoxin B1 - peroxidase conjugate, then plates were incubated. The plates were again washed, and the amount of conjugate perosidase conjugate bound to the antibody was determined after addition of the substrate solution consistion of O - phenylene diamine and hydrogen peroxide. The change in absorbance was monitored at a wavelenght of 490 nanometer. ELISA method is more rapid, less expensive, and saver than the physio - chemical method of aflatoxin analysis.
ปีเริ่มต้นงานวิจัย: 2534
ปีสิ้นสุดงานวิจัย: 2534
ลิขสิทธิ์: แสดงที่มา-อนุญาตแบบเดียวกัน 3.0 ประเทศไทย (CC BY-SA 3.0 TH)
เผยแพร่โดย: กรมวิชาการเกษตร
บทคัดย่อ: ไม่พบข้อมูลจากหน่วยงานต้นทาง
ภาษา (EN): th
หากไม่พบเอกสารฉบับเต็ม (Full Text) โปรดติดต่อหน่วยงานเจ้าของข้อมูล

การอ้างอิง

ประวัติ ตันบุญเอก. "การตรวจสอบสารพิษแอฟลาทอกซิน โดยวิธี ELISA (Enzyme - Linked Immunosorbent Assay)Detection of Aflatoxin B1 by Enyzme - Linked Immunosorbent Assay (ELISA)". กรมวิชาการเกษตร. 2534

ประวัติ ตันบุญเอก. "การตรวจสอบสารพิษแอฟลาทอกซิน โดยวิธี ELISA (Enzyme - Linked Immunosorbent Assay)Detection of Aflatoxin B1 by Enyzme - Linked Immunosorbent Assay (ELISA)". กรมวิชาการเกษตร. 2534. Print.



TARR Wordcloud:
การตรวจสอบสารพิษแอฟลาทอกซิน โดยวิธี ELISA (Enzyme - Linked Immunosorbent Assay)
ประวัติ ตันบุญเอก
กรมวิชาการเกษตร
2534
เอกสารแนบ 1
Development of botulinum toxin detection assay by antibody capture ELISA การพัฒนาวิธีการตรวจสอบสารพิษ Fumonisin B1 ในข้าวโพดด้วยวิธี ELISA การพัฒนาวิธีการตรวจหาสารพิษ Botulinum toxin ด้วยวิธี Antibody Capture ELISA การพัฒนาวิธี ELISA และการยับยั้งการตกตะกอนกับเม็ดเลือดแดงสำหรับตรวจสอบแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสหลอดลมอักเสบติดต่อ การพัฒนาชุดตรวจสารฆ่าแมลงกลุ่มไพรีทรอยด์สังเคราะห์โดยเทคนิค ELISA การพัฒนาเทคนิคELISAในการตรวจสอบเชื้อBmNPV ใช้เทคนิค ELISA test kit ในภาคเกษตรกร การพัฒนาชุดทดสอบ ELISA ด้วย electro elution แอนติเจน เพื่อหาแอนติบอดีต่อโรคทริคิโนซิสในสุกร การพัฒนาชุดตรวจสารฆ่าแมลงกลุ่มไพรีทรอยด์สังเคราะห์โดยเทคนิค ELISA (ต่อยอดจากปี2556) การพัฒนาชุดทดสอบ ELISA ด้วย electro elution แอนติเจน เพื่อตรวจหาแอนติบอดีต่อโรคทริคิโนซิสในสุกร

แสดงที่มา-อนุญาตแบบเดียวกัน 3.0 ประเทศไทย (CC BY-SA 3.0 TH)
คัดลอก URL
กระทู้ของฉัน
ผลการสืบค้นทั้งหมด โพสต์     เรียงลำดับจาก
พัฒนาระบบโดยศูนย์ความรู้เฉพาะด้านวิศวกรรมความรู้และวิศวกรรมภาษาDeveloped by Center of Excellence for Unified Knowledge and Language Engineering
สนับสนุนโดยสำนักงานพัฒนาการวิจัยการเกษตร (องค์การมหาชน)Supported by the Agricultural Research Development Agency (Public Organization)
แบบสำรวจความพึงพอใจQuestionair